方法原理 
　　先天性甲状腺功能低下是引起最常见的先天性痴呆的病因之一，但它是可以预防的。由于先天性甲状腺功能低下的婴儿缺乏早期症状，因此从1974年开始，发达国家已普遍实行新生儿先天性甲状腺功能筛查。本试剂盒采用双抗体夹心法原理。将标准血片、质控血片和待检标本用3毫米直径打孔器打下，分别加入包被有链霉亲和素的酶标板的不同孔中。再加入生物素标记的抗TSH单克隆抗体溶液，该溶液可有效洗脱并结合标本中的TSH。在洗脱阶段，与TSH结合的抗TSH单克隆抗体通过亲和素-生物素反应而结合在酶标板的孔中。冲洗后加入辣根过氧化物酶标记的抗TSH单克隆抗体。该抗体可与TSH结合。冲洗后加入底物。底物在辣根过氧化物酶的作用下产生颜色反应。反应30分钟终止后，用酶标仪测量OD值。TSH浓度与显色程度(黄色)成正比。根据标准曲线计算出待检标本中TSH的含量。本品仅用于新生儿先天性甲状腺功能的筛查，粗筛TSH异常的患儿，需采用确认试验进一步确认。

　　本试剂盒组份
　　　　酶标板　　　　6块
　　　　TSH标准血片　2套(浓度：0、6、12、30、60、120μIU/ml)
　　　　TSH质控血片　2套（浓度6.7-9.1、28.9-40.9、 67.2-90.9μIU/ml）
　　　　酶标抗体溶液　1.4毫升
　　　　洗脱液　　　　70毫升
　　　　稀释液　　　　70毫升
　　　　显色剂　　　　70毫升
　　　　终止液　　　　70毫升
　　　　（20×）浓缩洗液100毫升
　　　　封板胶　　　　18张

　　操作步骤
　　1.实验准备：
　　实验前先将标准对照样本、待检样本、酶标板及试剂在室温下放置30分钟。
　　2.标本的收集与处理：
　　标本的收集与处理应遵照美国公共卫生实验室指导原则进行。采集血样时，应避免用力穿刺足跟部位，以免组织液流出而稀释血样。待检血标本及对照标本应放在密封袋内，以免在冰箱内受潮。在待检标本上打孔时，应选取从双面渗透血液的中心部位打孔。
　　3.试剂准备：
　　(1)酶稀释溶液的配制：取220微升酶标抗体溶液稀释于11毫升稀释液中，为一个酶标板的用量。使用前半个小时内稀释。
　　(2)洗液的配制：取洗液一瓶，加蒸馏水到2升，搅拌均匀。
　　4.实验步骤：
　　（1）将直径3毫米的标准血片、质控血片及待检标本加入酶标板中；
　　（2）每孔加入洗脱液100微升；
　　（3）封好封板胶。在室温下用匀质晃动器晃动混合至少4小时，使其充分反应，最好室温过夜；
　　（4）甩出孔中的标本纸片。用洗液300-350微升洗4次，每次在吸水纸上拍干；
　　（5）用移液器取100微升配好的酶稀释溶液，加入酶标板中；
　　（6）封好封板胶，用匀质晃动器在室温下晃动3小时。揭去封板胶，吸出或甩掉液体；
　　（7）用洗液300-350微升洗4次，每次在吸水纸上拍干；
　　（8）加100微升显色剂于各孔中，轻轻晃动酶标板，使液体分布均匀。封好封板胶，在室温下避光放置30分钟；
　　（9）加100微升终止液于各孔中，混匀；
　　（10）30分钟内用酶标仪测定其OD值。用450nm作为检测波长，620nm作为参考波长。
　　5. 正常新生儿参考值：低于20μIU/ml。
　　6. 质量控制：本试剂盒本底OD值应不大于0.030,标准品(120)的OD值应在0.7-2.0范围之内。质控血片1应在6.7-9.1μIU/ml范围内。质控血片2应在28.9-40.9μIU/ml范围内。质控血片3应在67.2-90.9μIU/ml范围内，否则全部试验无效

　　注意事项
　　1. 本品仅适用于美国S&S 903#滤纸制作血片。
　　2. 打血片应尽量避免血斑边缘。
　　3. 洗板要洗干净，拍干净。
　　4. 标准血片的标准值应在酶标仪中设定正确。
　　5.  酶标板不能受潮。
　　6.  冰箱温度以2-8℃为宜，温度过低会影响酶的活性。
　　7. 洗脱时间不能过短，最好室温过夜。
　　8. 每次实验完毕，将洗板机用蒸馏水清洗干净以防止盐类结晶堵塞洗板机管道。
　　9.  请勿把不同批号的试剂混在一起使用。请勿用过期试剂盒。每作一块板的实验时都必须作一个标准对照。检测标本量大时，同一批号的试剂可以混在一起使用。

　　质量标准
　　　　最低检测限    1μIU/m1
　　　　精密度        CV(%)<15%
　　　　复孔精密度*   CV(%)<15%
　　　　交叉试验      与hFSH、hLH、hCG无交叉反应
　　　　*注：当复孔精密度大于15%时，该值结果不可信，实验应重复。

　　保存条件及有效期
　　保存于2-8℃，有效期6个月。